Zmrazovanie embryí a spermií (Riadenie reprodukcie)
22.06.2012 12:59
Zmrazovanie embryí a spermií
- Dôležitou technikou dlhodobého uchovávania embryí a spermií je ich zmrazovanie (kryouchovávanie).
- Umožňuje vytváranie bánk inseminačných dávok a embryí aj z kvalitnejšieho genetického materiálu.
- Opodstatnenie zmrazovania embryí a spermií je aj v zachovaní génových rezerv najmú ak sa jedná o plemená, ktorým hrozí vyhynutie.
- Základom kryouchovávania cicavčích embryí je zníženie miery poškodenia vplyvom intracelulárnej tvorby ľadu.
- Vyvinuté boli dve základné techniky:
o pomalé kryouchovávanie
o rýchle zmrazovanie (vitrifikácia)
- Kryouchovávanie biologického materiálu zahŕňa šesť krokov: prvotné kryoprotektívum, ochladenie (rýchle, pomalé) pod bod mrazu, uskladnenie v tekutom dusíku pri 196°C, rozmrazenie, zriedenie a vyplavenie kryoprotektíva a prenesenie biologického materiálu do fyziologických podmienok.
- Kryouchovávanie spermií je možné realizovať dvoma spôsobmi do pejet a zmrazovanie do peliet.
- Problémom – nízka motilita a prežívateľnosť spermií po rozmrazení.
- Dôležitá podmienka: vytvorenie takého prostredia pre smermi, ktoré sa najviac približuje prirodzeným podmienkam vytvoreným semennou plazmou – potrebné riedidlá.
Prenos embryí – embryotransfer
- Princíp metódy spočíva v prenose embryí získaných od jednej samice (donorky) do druhej samice (recipienkty) pričom obidve musia mať zosynchronizovaný pohlavný cyklus.
- Úspešnému ET predchádza zvládnutie metód superovulácie a synchronizácie pohlavného cyklu.
- Význam ET:
o možnosť získať potomkov od starších problémových zvierat s vysokou plemennou hodnotou,
o produkcia geneticky modifikovaných zvierat cestou prenosu embryí, ktoré prešli určitými genetickými manipuláciami
o prispieva k zachovaniu genofondu autochrómnych plemien vrátane medzidruhového prenosu,
o slúži ku komerčne zrejme najzaujímavejšiemu cieľu, ktorým je rozšírenie genofondu superkvalitných zvierat, veľký význam má aj v humánnej medicíne, kde pomáha riešiť otázku neplodnosti manželských párov, ktorá je v súčasnosti veľmi aktuálna.
o Autoftómne plemená – pôvodné
- Základné faktory ovplyvňujúce výsledok prenosu embryí:
o kvalita získaných embryí.
o vývojové štádium prenášaných embryí (v závislosti od druhu).
o synchronizácia ruje donoriek a recipientiek (vyber vhodných zvierat vo vzťahu k produkcii).
o kondičný a zdravotný stav donoriek (vysoká plemenná hodnota) a recipientiek (nízka plemenná hodnota).
o zložená metóda prenosu (chirurgicky, nechirurgicky)
o keď je blastomér alebo blastoméra tak je najväčšia možnosť prijatia sa u darkyne.